Dark Field Microscopy: Essential Färdigheter och kunskaper om principer
Först och främst, låt oss prata om strukturen och egenskaperna hos det mörka fältmikroskopet, varför det kallas ett mörkt fältmikroskop, vilka experiment som kan använda det och hur man använder den väl. Du kommer att ha en detaljerad förståelse för den här artikeln.
Den första är strukturen för det mörka fältmikroskopet. I vårt dagliga liv är det inte lätt att se det partikelformiga damm som flyger inomhus, men i ett mörkt rum, om en ljusstråle kommer i snett från dörren spricka, kan dammpartiklar ses, vilket är ett optiskt Dindar -fenomen. Det mörka fältmikroskopet är utformat baserat på denna princip. Dess strukturella egenskap är främst för att använda en central skuggningsplatta eller en mörk fältkondensor, vanligtvis används som en parabolisk kondensor, så att den centrala strålen för ljuskällan är blockerad och inte kan komma in i objektivlinsen genom provet från botten till topp. Så att ljuset ändrar sin väg och lyser snett på det observerade exemplet, och provet reflekterar eller sprids när det möter ljuset, och det spridda ljuset läggs i det objektiva linsen, så att hela synfältet är mörkt. Det som observeras i det mörka fältet är den diffraherade ljusa bilden av det inspekterade objektet, inte själva objektet, så bara objektets existens och rörelse kan ses, och objektets fina struktur kan inte särskiljas. Men när det inspekterade objektet är heterogent och större än 1/2 våglängd, kommer alla nivåer av diffraherade strålar in i objektiva linsen samtidigt, och strukturen för objektet kan observeras i viss utsträckning. Även om det allmänna mörka fältmikroskopet inte kan se den fina strukturen för objektet tydligt, kan det skilja för existensen och rörelsen av partiklar över 0. 0 04 um, vilket är en karakteristik att vanliga mikroskop (den maximala upplösningen är 0,2 um) har inte och kan användas för att observera strukturen hos levande celler och rörelse i partiklarna.
För att göra den centrala skuggplattan kan det vanliga mikroskopet omvandlas till ett mörkt fältmikroskop så länge kondensorn är avtagbar och konsolens diameter är lämplig för att installera den mörka fältkondensorn. När det inte finns någon mörk fältkondensor kan en central skuggningsplatta tillverkas av tjockt svart papper och placeras på filterramen under kondensorn på det vanliga mikroskopet, och den mörka fälteffekten kan också erhållas.
Justera mikroskopkondensorn till högsta läge och justera brännvidden med en lågeffektspegel.
Ta av okularet, observera och justera storleken på membranet från linsfatet för att göra det lika med synfältet för det objektiva linsen som ses i linsfatet.
Skär den centrala ljusskölden med tjockt svart papper. Diametern på den yttre ringen är densamma som för filterramen, och storleken på den centrala delen är densamma som den för den justerade öppningen av membranet (en liten bit genomskinlig papper kan placeras på spegelytan på kondensorn vid det lätta hålet, och den ljusa platsen som visas på papperet är överföringen av diaken, och då är den lätta hålet).
Lägg den centrala ljusskölden på filterramen och öppna bländaren för att observera provet.
Om det är nödvändigt att observera det mörka fältet med en högdriven spegel, bör den centrala ljusskölden omarbetas beroende på storleken på synfältet efter att ha fokuserat med den högdrivna spegeln.
Spara de centrala skuggplattorna som gjorts av dem så att de kan användas i senare experiment.
Metod för tillämpning. Installera den mörka fältkondensorn på mikroskopets kondensorfäste.
Välj en stark ljuskälla, men förhindra att direkt ljus kommer in i objektivlinsen, så använd i allmänhet en mikroskoplampa för belysning.
En droppe doftande asfalt bör tillsättas mellan kondensorn och provet för att förhindra att belysningsljuset helt återspeglas på kondensorn, och det detekterade föremålet kan inte uppnås så att den mörka fältbelysningen inte kan erhållas.
Att lyfta ljussamlaren, rikta in fokus för ljussamlaren på det detekterade objektet, det vill säga bestrålning av det detekterade objektet med konstrålens topp. Om kondensorn kan röra sig horisontellt och är utrustad med en mittjusteringsanordning, bör centrumjusteringen utföras först så att kondensorns optiska axel och den optiska axeln för mikroskopet är strikt i en rak linje.
Välj den objektiva linsen som motsvarar kondensorn, justera brännvidden (driftsmetoden är densamma som för det vanliga mikroskopet) och hitta objektbilden som ska observeras.
Slutligen, observera de levande cellerna under Darkfield -mikroskopet på undervisningsplattformen. I den mörka bakgrunden kan de diffraherade lätta bilderna av celler, kärnor och organeller ses.
