Allt till ofta, sofistikerade och välutrustade mikroskopar inte med utmärkta bilder på grund av felaktig användning av ljuskällan, vilket vanligtvis leder till otillräcklig provbelysning. När det är optimerat bör belysningen av provet vara ljust, bländfritt och jämnt spridd i synfältet.
Det finns många ljuskällor tillgängliga för att belysa mikroskop, både för rutinobservation och kritisk fotomikrografi. En vanligaste ljuskälla, på grund av dess låga kostnad och långa livslängd, är 50 eller 100 watt volframlampan, såsom illustreras vid basen av mikroskopdiagrammet i figur 1, som också beskriver de optiska vägarna i ett typiskt modernt sändat ljusmikroskop. I denna figur avger volframhalogenlampan ett kontinuerligt spektrum av ljus centrerat vid 3200 K (när den är inställd på en lampspänning på +9 volt), som sedan passeras genom en samlare och fältlins innan den reflekteras i substage kondensorn och på provet. Bildformande ljusstrålar fångas av mikroskopmålet och passerar antingen in i okularna eller regisseras av en BeamSplitter till en av flera kameraportar. Under mikroskopets optiska väg riktas och fokuseras belysning genom en serie membran och linser när den reser från källan för att belysa provet och sedan in i okular eller kamerafästning. Justering av de optiska komponenterna i ett mikroskop för att optimera belysningen i moderna mikroskop utförs efter reglerna av Köhler -belysning. Mer detaljer om hur både överförda och reflekterade ljusmikroskop är inriktade för ordentligt belysning som diskuteras i våra sektioner om att inrätta ett mikroskop som är försedda ljusandreflekterat ljus. De optiska vägarna som visas ovan i figur 1 är typiska för ett överförd ljusmikroskop och involverar ett antal linser, membran, speglar och strålsplitterare för att rikta ljus genom mikroskopet.
Volframhalogenlampor är relativt ljusa med ett färgspektrum centrerat vid 3200 K (när de är inställda på ungefär +9 volt), men kräver färgkonverteringsfilter för att höja sin färgtemperatur till dagsljusekvivalens. En annan populär ljuskälla är 75 till 150 watt Xenon -lampan på grund av dess mycket höga ljusstyrka och långa livslängd, en relativt jämn utgång över det visuella spektrumet och en färgtemperatur som approximerar som krävs genom dagsljusemulsioner. Där mycket hög ljusintensitet krävs används ofta tennhaltidlampor. Influorescencemicrocopy, särskilt för kritisk fotomikrografi, 100 watt eller 200 watt kvicksilverbrännare används ofta. Under tidigare år kan kolbågljus eller zirkoniumlökor ha använts, men dessa källor ses sällan idag. För mer information och en detaljerad diskussion av det breda spektrumet av lampor som är tillgängliga för mikroskopbelysning, besök vår avsnitt Onlight -källor för mikroskopi och fotomikrografi.
Justering av källbelysning genom optiska vägar i reflekterad ljusmikroskopi är också av primär oro, särskilt med avseende på metallografi, halvledarskivskontroll och den anmärkningsvärda nya framsteg som görs i fluorescensmikroskopi. Reflekterade ljusmikroskop är också upplysta med en mängd ljuskällor (som diskuterats ovan) och kan justeras för optimal prestanda med Köhler -belysning. Detta diskuteras mer detaljerat i vårt avsnitt om konfiguration av Köhler -belysning för reflekterad ljusmikroskopi. Belysningsvägar för reflekterad ljusmikroskopi är också ämnet för flera interaktiva Java -tutorials inklusive den som är länkad direkt nedan.
I sin utmärkta bok "Photography Through the Microscope" är John DellyArgues att mellan 80 och 90 procent av alla fotomikrografer som lämnats in till tävlingar, utställningar och vetenskapliga publikationer offer för felaktigt inriktade optik vilket resulterar i dålig provbelysning. Detta är ett av de vanligaste problemen med mikroskopi och fotomikrografi i allmänhet, och en överraskningsundersökning av studentmikroskop i många universitetslaboratorier kommer att avslöja ett överflöd av dåligt justerade substage kondensatorer och belysningskällor. Vi misstänker att felaktig justering och justering av både substkondensorn och fältmembranet, över hela målområdet i ett givet mikroskop, är den största källan till fel i fotomikrografi.
Nödvändigheten för korrekt belysning kan inte betonas. Alltför ofta reduceras en $ 25, 000 mikroskop till nivån på en handförstorare genom felaktig belysning och inriktning, vilket resulterar i fotomikrografer som överträffas av de som tas med ett $ 2000 -mikroskop under optimala förhållanden Ofköhler -belysning. I följeslagssektionerna i denna primer som hanterar teorin om Köhler -belysning och dess implementering (båda Fortransmittedandreflected Light) diskuterar vi kritiska aspekter av mikroskopkonfiguration och har inkluderat en mängd interaktiva interaktiva
